緊湊型光譜儀進行UV吸收度量測
緊湊型光譜儀進行UV吸收度量測
重點:
• 蛋白質
• 紫外光響應
• DNA
技術:
• 吸光度
應用:
• 藥品分析
• 蛋白質濃度測量
• DNA分析
SR6是台體積緊湊且有著極佳紫外光響應的光譜儀。其高信噪比 (SNR) 性能和優異的熱穩定性，使其成為包括藥物分析、蛋白濃度測量以及紫外等離子體監測等應用的理想選擇。在這篇應用筆記裡，我們評估SR6作為紫外吸收度測量的選項。
SR6是一款多用途光譜儀，適合作為實驗室裡的設置或是客製化系統整合進大批量工業和OEM應用。此光譜儀的型號涵蓋約185-1100nm的波常範圍，並連接到光源、光纖、採樣光學元件來優化各種應用的光譜設置。
其中一個區分出SR6的特徵是他的紫外光區段響應，特別是在200-280nm的範圍。這種紫外響應主要取決於探測器的性能，並可通過與專為紫外設計的光學平台元件（如光柵等）配合使用來充分發揮效果。加入紫外光源以及紫外光穿透率良好的採樣光學元件來提供應用最好的配置。
為了觀察SR6光譜儀的紫外響應以及吸收線性度，我們量測水中不同濃度的DNA樣品的吸收度以及有NIST認證的重鉻酸鉀標準品。
DNA樣品的紫外吸收度
對於DNA測量，我們的樣品是在1公分光程的石英比色皿中測量的去氧核醣核酸(游離酸粗寡核苷酸)。樣品的稀釋方式為吸走0.5毫升的樣品並加入0.5毫升的天然礦泉水然後使用拋棄式吸液器攪勻。在稀釋過程中，比色皿不受干擾，以防止樣品汙染或比色皿沒放好導致產生誤差。
我們的設置包含了SR6光譜儀、氘鹵燈(只使用氘燈來提供紫外照明)、一公分比色皿以及支架、和保偏光纖。光譜儀及燈源會在使用前先暖機30分鐘，光纖也會使用可調式衰減器，在必要時可以控制從氘燈導入光譜儀的光強。
我們量測近30種不同的寡聚DNA濃度，從0.5到70微克/毫升，所得光譜顯示了在紫外光區域的高訊號品質以及整個光譜的一致性(圖一)。
圖一: SR6藉由極佳的紫外光區域響應，是一種用於量測像是蛋白質或DNA這類生物大分子的多功能光譜儀。
重鉻酸鉀標準品的吸光度
為了評估SR6的吸收線性度，我們使用265nm LED進行照明，測量重鉻酸鉀溶液在257nm處的吸收度。標準品的不同濃度能量到高吸收線性度(圖二)。
圖二: SR6在紫外光有著良好的吸收線性度，隨著額外的量測能看到最大的線性吸收度近2AU。
有著高吸收線性度的光譜儀，使用者能準確量測廣闊的樣品濃度範圍以及在實驗中最小化樣品的準備。這對於那些想要非常準確的實驗準確性或是能使用的樣品數有限的應用是很重要的。
SR6的訊號雜訊比(訊雜比)增強
SR6光譜儀與OceanView光譜軟體一起使用，以及OceanDirect，一款功能強大的跨平台軟體開發套件，具有應用程式介面。
OceanDirect能讓使用者編寫客製化的軟體方案來讓他們的光譜儀能最佳化其表現，也能存取關鍵數據進行分析。OceanDirect也能夠使用高速平均模式，是一種硬體加速訊號平均工具，藉由排除每個光譜的輸出時間在單位時間內顯著提高光譜儀的訊噪比。
通常，為了提高訊噪比，使用者會求助於訊號平均，在主機的軟體裡對光譜進行平均來達成。跟HSAM硬體加速平均做比較，這需要更多時間來計算等效平均數量。因此，SR6會在給定的時間內進行更多的光譜平均數，並產生遠高於原先的單位時間訊雜比，高達3500:1。這對即時應用是很重要的，決策必須快速執行並且高度準確。
SR6的額外功能
SR6有個觸發功能，可以實現將光譜擷取與外部事件(例如燈的脈衝)同步或定時光譜擷取以滿足某些取樣條件等操作。觸發功能能提供準確的定時以及同步在SR6光譜儀與其他設備間，增添了另一種功能性在你的光譜量測中。